| |||||
МЕНЮ
| Класс жгутиковые: лейшмании, трихомонады, лямблии, трипаносомытрипаносом здесь значительно меньше, поэтому требуется просматривать большое число препаратов. В хронической стадии паразиты в крови встречаются очень редко, поэтому исследование периферической крови бывает малоэффективным. В таких случаях рекомендуется заражение белых мышей или морских свинок, а также посевы на питательные среды. С целью диагностики используют серологические реакции: связывания комплемента, агглютинации, флюоресцирующих антител. Лямблии Строение. Лямблия (Lamblia intestinalis) впервые была описана русским ученым Д. Ф. Лямблем (1859), в честь которого она и получила свое название. Лямблия существует в виде вегетативной формы (трофозоит) и цисты (рис. 10). Вегетативная форма активная, подвижная, грушевидная, передний конец тела закруглен, задний заострен. Длина 9—18 мкм. В передней части тела находится присасывательный диск в виде углубления. Имеет 2 ядра, 4 пары жгутиков. Жгутики, проходя частично в цитоплазме, образуют два хорошо видимых при окраске продольных пучка. [pic] Рис № 10 Лямблии При наблюдении в живом состоянии движение очень характерное, паразит все время переворачивается боком за счет вращательного движения вокруг продольной оси. В препарате при комнатной температуре лямблии быстро погибают. Пищу всасывают всей поверхностью. Размножаются продольным делением. Цисты — это неподвижные неактивные формы паразита. Длина 10—14 мкм. Форма овальная. Оболочка сравнительно толстая, хорошо очерчена, часто в значительной своей части как бы отслоена от тела самой цисты. Этот признак помогает отличать цисты лямблий от других сходных образований. В растворе Люголя окрашиваются в желтовато-коричневатый цвет. Окрашивание позволяет видеть в зрелой цисте 4 ядра. Цикл развития. Обитают в верхнем отделе тонкого кишечника. С помощью присасывательного диска прикрепляются к ворсинкам. В желчном пузыре лямблий не живут, так как желчь на них действует губительно. Частое обнаружение их при дуоденальном зондировании объясняется тем, что лямблий попадают в содержимое двенадцатиперстной кишки с ее стенок. Обычно вегетативные формы с испражнениями не выделяются, однако при поносах их можно обнаружить в свежевыделенных жидких фекалиях. Лямблий, попадая в нижние отделы кишечника, где условия для них неблагоприятные, превращаются в цисты, которые и выделяются обычно с испражнениями. Цисты хорошо сохраняются во внешней среде, в зависимости от влажности и окружающей температуры — до месяца; при высушивании погибают очень быстро. Заражение может произойти через загрязненные руки, игрушки, пищу и воду. Цисты, попадая в кишечник, превращаются там в вегетативные формы. Одна циста образует две вегетативные формы. Клиника. Лямблии распространены очень широко, особенно часто они встречаются у детей. По мнению некоторых ученых, лямблии, особенно при большом их числе, могут вызывать механическое раздражение слизистой оболочки кишечника, в определенной степени затруднять всасывание жиров и жирорастворимых витаминов. При этом могут возникать нерезкие боли в животе, расстройство стула, снижение аппетита, иногда боли в правом подреберье (лямблиоз). В некоторых случаях лямблии могут ухудшить течение других заболеваний кишечника и желчных путей. Ряд ученых считают лямблии непатогенными. Таким образом, вопрос о патогенности лямблии в настоящее время окончательно не решен. Диагностика. Обнаружить лямблии у зараженного человека обычно сравнительно легко. . Исследование желчи. Желчь и содержимое двенадцатиперстной кишки, полученные при дуоденальном зондировании, осматривают и выбирают комочки слизи на предметное стекло и микроскопируют. Кроме того, материал центрифугируют, просматривают под микроскопом осадок. Этим методом можно обнаружить вегетативные стадии лямблий. В свежевыделенном материале, полученном при дуоденальном зондировании, можно обнаружить подвижные вегетативные формы. Исследование испражнений/ Сбор материала. Фекалии исследуют с целью обнаружения простейших кишечника. Движение простейших — одно из самых характерных и отличительных свойств, которое позволяет поставить правильный диагноз. Поэтому основное правило, которое необходимо неукоснительно выполнять — это подвергать исследованию только свежий материал. Промежуток времени от момента выделения до исследования не должен превышать 30 мин., т. е. в лабораторию должны доставляться фекалии в теплом виде. Под термином “теплые фекалии” надо понимать фекалии, не остывшие после выделения их из организма, но отнюдь не подогретые искусственно. Исследование оформленных испражнений допускается в течение 2 ч после выделения. Исследуемый материал собирают в чистую сухую посуду. Наиболее подходящими для этой цели являются картонные парафинированные стаканчики, которые после одноразового использования сжигают. Если фекалии собирают в стеклянную или фарфоровую посуду, то перед употреблением ее стерилизуют кипячением. Вегетативные формы простейших весьма чувствительны к химическим веществам, и если в посуде, куда собирают : фекалии, остаются следы дезинфицирующих веществ, простейшие быстро погибают и распознавание их становится трудным, а иногда и невозможным. Доставленный в лабораторию материал прежде всего подвергают макроскопическому осмотру. При этом отмечают консистенцию кала, наличие слизи и крови. Если в лабораторию доставлено одновременно несколько проб фекалий, в первую очередь подлежат исследованию неоформленные фекалии с патологическими примесями/ Сохранять пробу до исследования надо при обычной температуре в вытяжном шкафу. Помещать в термостат не следует, так как при повышенной температуре быстрее происходит размножение бактерий, больше образуется продуктов метаболизма, что приводит к быстрой дегенерации простейших. При каждом анализе испражнений с целью обнаружения простейших кишечника обязательным является исследование нативного препарата и мазка, окрашенного раствором Люголя. Нативный мазок. Жидкие кровянисто-слизистые испражнения без видимой примеси фекальных масс могут быть исследованы без добавления изотонического раствора хлорида натрия. Деревянной палочкой каплю испражнений переносят на предметное стекло и накрывают покровным стеклом. Пользоваться стеклянными палочками не рекомендуется, так как ими невозможно набирать слизистые комочки, в которых находятся простейшие. Правильно приготовленный препарат должен быть опрятным, покровное стекло должно плотно прилегать к предметному с равномерным распределением жидкости между стеклами без ее выступания за пределы покровного стекла. Мазок должен быть умеренной толщины. Густой мазок малопрозрачен и его трудно микроскопировать, если же взято слишком мало фекалий, то мазок получится разведенным и простейших можно не обнаружить. Через правильно приготовленный мазок должен быть виден печатный текст. Микроскопическое исследование свежего мазка нужно проводить, обязательно соблюдая следующие правила: 1) освещение препарата не должно быть ярким. Правильное освещение достигается соответствующим положением конденсора, который опускают тем больше, чем сильнее источник света. Используют также светофильтр; 2) препарат просматривают сначала под малым увеличением микроскопа (X 10), а потом с сухой системой большого увеличения; 3) передвигать препарат надо с таким расчетом, чтобы не пропустить какие-либо участки мазка или не попасть повторно на уже просмотренное место. При правильном освещении даже под малым увеличением можно увидеть вегетативные стадии и цисты лямблий. После ориентировочного просмотра под малым увеличением обязательно применяют большое увеличение (х10, х40). Циста в нативном мазке отличается от вегетативной стадии постоянной формой благодаря оболочке. Строение цист в нативном препарате плохо заметно, невидны ядра. Поэтому для уточнения вида применяют мазок, окрашенный раствором 'Люголя. Окраска раствором Люголя. Раствор Люголя по унифицированной методике рекомендуется следующего состава: йодид калия—3. г, кристаллический йод—'1,5 г, вода дистиллированная — 100 мл. Вначале растворяют йодид калия, затем йод. Раствор стабилен в темной склянке с притертой пробкой при комнатной температуре не более месяца. Цисты окрашиваются в золотисто-коричневый цвет. На фоне цитоплазмы заметны ядра, их строение и число. Хорошо виден гликоген, окрашивающийся в разные оттенки коричневого цвета. Методика просмотра препарата, окрашенного раствором Люголя, такая же, как и нативного мазка. Следует учитывать, что при окраске раствором Люголя вегетативные стадии погибают и определяются с трудом. Так, если фекалии оформленные, то в нативном мазке при микроскопии ( х 400) обнаруживают цисты. Сочетание методов копроскопии и дуоденального зондирования повышает частоту выявления лямблиоза. Следует отметить, что широкое распространение лямблии (носительство) нередко вводит в заблуждение и вызывает гипердиагностику лямблиоза. Поэтому при наличии клинической картины поражения желудочно-кишечного тракта или желчных путей необходимо исключить другие возможные причины заболевания, например провести бактериологические исследования. Трихомонады. Виды. У человека обитают три вида трихомонад (рис. 11):Trichomonas hominis— кишечная, обитающая в толстом кишечнике; Trichomonas tenax— ротовая, обитающая в полости рта; Trichomonas vagimalis— влагалищная, паразитирующая в мочеполовых путях. [pic] Рис № 11. Трихомонады а- трихомонада влагалищная, б- трихомонада кишечная, в- трихомонада ротовая. Строение. Кишечная трихомонада имеет грушевидное тело длиной 8—20 мкм. От переднего конца тела отходят обычно 5 жгутиков. С одной стороны тела по всей его длине расположена волнообразна; перепонка (ундулирующая мембрана), по наружному краю которой про ходит тонкая нить, выступающая своим свободным концом в виде жгутика. В цитоплазме при окраске видны ядро и осевая нить. Движение трихомонады активное, беспорядочное, “суетливое”. Наряду с поступательным движением трихомонады вращаются вокруг продольной оси. Мембрану удается заметить только при замедлении движения трихомонады или при ее остановке в виде периодически пробегающих волн по одной из сторон тела. Размножается делением. Цист не образует. Обитает в толстом кишечнике человека. В жидких испражнениях может обнаруживаться в очень больших количествах. В ряде случаев играет определенную роль в развитии или ухудшении течения заболеваний толстого кишечника, особенно у детей раннего возраста. Ротовая трихомонада по строению похожа на кишечную, ее длина 6—13 мкм, ундулирующая мембрана не достигает конца тела. Цист не образует. Патогенное значение не доказано, хотя и имеются данные о значительно более частой встречаемости у лиц с различными заболеваниями полости рта и зубов (гингивит, пародонтоз, кариес зубов) и о неблагоприятной роли этих простейших в поддержании патологического процесса. Некоторые исследователи обнаруживали трихомонад в мокроте больных легочными заболеваниями, а также в удаленных хирургическим путем бронхоэктазах и абсцессах легких. Все это заставляет обратить внимание на необходимость более широкого применения лабораторных методов исследования с целью выявления ротовых трихомонад в стоматологических и терапевтических медицинских учреждениях. Трихомонад обнаруживают при микроскопии нативных или окрашенных мазков из соскоба ротовой полости (с зубов, десен, из очагов воспаления и нагноения), в бронхиальной слизи и мокроте. Выявляемость увеличивается с применением методов посева на питательные среды. Влагалищная трихомонада имеет грушевидное тело длиной 14—30 мкм (см. рис. 12). [pic] Рис № 12. Трихомонада влагалищная I – мазок на культуры,II- мазок из влагалища, III- мазок из влагалища ( окраска метиленовым синим) а- трихомонада: 1 ядро, 2 базальные тельца, 3 передние жгутики, 4 ундулирующая мембрана, 5 аксостиль, 6 парабазальная нить, 7 лейкоциты. в – эпителиальные клетки. На переднем конце тело имеет 4 жгутика и ундулирующую мембрану, доходящую только до середины тела. Ближе к переднему концу располагается ядро. Сквозь все тело проходит осевая нить (аксостиль), выступающая на заднем конце в виде шипика. Цитоплазма содержит вакуоли. Цист не образует, во внешней среде быстро погибает. Играет заметную роль в патологии мочеполовой системы, особенно у женщин. Наблюдается и длительное бессимптомное носительство, чаще у мужчин. Основными симптомами заболевания, которое называется мочеполовым трихомонозом, являются зуд, боль, жжение, серозно- гнойные выделения (бели). Трихомонады этого вида передаются лишь половым путем. Иногда высказываемое мнение о том, что трихомонады могут переселиться во влагалище из кишечника, неверно, так как кишечная и влагалищная трихомонады — это разные виды с различными требованиями к условиям среды обитания. Диагноз ставят при обнаружении трихомонад в выделениях мочеполовых путей методом микроскопии нативных или окрашенных по Романовскому мазков Диагностика. Исследование выделений мочеполовых путей. При воспалительных заболеваниях мочеполовых путей обязательно исследование на наличие влагалищных трихомонад. Патологические выделения у женщин берут для исследования с помощью влагалищных зеркал и тампона со слизистой оболочки влагалища или из его заднего свода, а при обилии выделений — с наружных половых органов или с пальца резиновой перчатки после осмотра больной врачом. Из уретры получают материал с помощью специальной ложечки, которую вводят до сфинктера. У мужчин до мочеиспускания из уретры выдавливают каплю выделений. Для исследования мочевого пузыря мочу получают катетером и микроскопируют осадок после ее центрифугирования. Во всех случаях 1—-2 капли выделений необходимо сразу же поместить в каплю изотонического раствора хлорида натрия на предметном стекле, накрыть покровным стеклом и исследовать при среднем увеличении (Х40, х10) с сухой системой. В препарате, приготовленном указанным способом, вследствие быстрого высыхания подвижность трихомонад вскоре прекращается. Поэтому рекомендуют готовить препарат по типу “висячей капли”. В получающейся при этом влажной камере, где благодаря вазелиновой прокладке создается герметичность и замедляется высыхание препарата, подвижность трихомонад может наблюдаться иногда в течение часа. Это дает возможность готовить препараты в процедурном кабинете и направлять их в лабораторию (в холодное время года препараты надо доставлять в утепленном биксе). В нативном препарате трихомонады легко отличаются от лейкоцитов и других клеток по движению, а также по наличию жгутов и ундулирующей мембраны. Более четко трихомонады видны при исследовании в темном поле или при фазово- контрастной микроскопии. В несвежем или подсохшем мазке трихомонады быстро прекращают свое движение, и в таком случае их определение становится практически невозможным. Для диагностики трихомонадного поражения из исследуемого материала в процедурном кабинете готовят мазки и направляют в лабораторию, где их после подсушивания фиксируют и красят по Романовскому. В окрашенных препаратах достаточно четко выявляются особенности морфологии трихомонад, что наряду с неограниченным временем исследования (в противоположность нативному мазку, где сроки доставки и микроскопии ограничены временем сохранения подвижности трихомонад) делает этот метод достаточно удобным для практических условий. Окраска по Романовскому дает лучшие результаты в модификации Н. А. Цагикян (1954). Для этого фиксированный тонкий мазок красят 40 мин краской следующего состава: воды дистиллированной 100 мл, 1% раствора карбоната натрия 15 капель и краски Романовского 4 мл. По указанной модификации более четко красятся жгутики, трихомонады становятся хорошо различимыми. Ядра окрашиваются в фиолетово-рубиновый или фиолетовый цвет, цитоплазма—в голубой, жгутики и некоторые другие структурные образования — в розово-- красный. Повышению эффекта лабораторного исследования способствует просмотр нативных и окрашенных препаратов. Список используемой литературы. 1. Генис Д.Е. Медицинская паразитология, М. «Медицина», 1985 г 2. Воробьев А.А. Микробиология и иммунология, М. «Медицина», 1999 г. 3. Коротеев А.И. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология, С- П., 1998 г. 4. Золотницкий В.С. Руководство к практическим занятиям по эпидемиологии и паразитологии, М. «Медицина», 1975 г. 5. Слюсарев А.А. Биология с общей генетикой, М. «Медицина», 1978 г. 6. Чернес Ф.К. Микробиология, М. «Медицина», 1987 г. 7. Ярыгин В.Н. Биология, М. «Медицина», 1980 г. Страницы: 1, 2 |
ИНТЕРЕСНОЕ | |||
|